Диагностика острого лейкоза у детей. Исследования при лейкозе

Диагностика острого лейкоза у детей

Диагностика острого лейкоза у детей это многоступенчатый диагностический поиск, который включает в себя весь спектр анализов. Диагноз ставится на основании клиники и следующих диагностических критериев:

Общий анализ крови

Выявление нормохромной, нормоцитарной, гипорегенераторной анемии; тромбоцитопении; лейкоцитопении или лейкоцитоза; обнаружение наличия бла­стов («лейкемический вариант»), отсутствия бластов («алейкемический вариант»), «лейкемического провала или зияния» (отсутствие переходных форм между бластами и зрелыми клетками).

Диагностика острого лейкоза у детей

Биохимический анализ крови

  • Увеличение уровня ще­лочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы;
  • Повышение содер­жания калия, мочевой кислоты, фосфатов, снижение кальция (при синдроме лизиса опухоли);
  • Повышение уровня AJIT, ACT (при поражении печени).

Костно-мозговая пункция и трепанбиопсия

Показания к пункции костного мозга: би- и моноцитопении, рефрактерные анемии и анемии неясного генеза, тромбоцитопении, гепатоспленомегалия, генерализованное увеличение лимфатических узлов.

Морфологическое исследование костного мозга

Диагностика острого лейкоза у детей: метод морфологического исследования костного мозга (окраска нативных мазков костного мозга) — оценка миелограммы (25— 30 % и более клеток с морфологическими признаками бластов, увеличение лейко-эритроцитарного со­отношения;

угнетение нормальных ростков гемопоэза: гранулоцитарного, эритроидного, мегакариоцитарного; при ОМЛ — палочки Ауэра) и количественного определения миелокариоцитоза (увеличение количества миелокариоцитов — норма 95 — 250 х 109/л).

Морфоцитохимический анализ костного мозга

Диагностика острого лейкоза у детей и метод морфоцитохимического анализа костного мозга с использованием световой и электронной микроскопии: точ­ная диагностика L b L 2, L 3 форм ОЛЛ и М0, М 1 — М 7 вариантов ОМЛ. Для достоверного разделения форм ОЛЛ и вариантов ОМЛ используют химический анализ лейкозных клеток. Чаще всего используют следующие цитохими­ческие реакции: на пероксидазу, ШИК- или PAS- реакция (на гликоген).

При OЛЛ — гранулярный продукт реакции в виде красных зёрен в цитоплазме, а при ОМЛ — диффузная или диффузно-гранулярная реакция; положительная реакция на миелопероксидазу и липиды (окраска Суданом чёрным В) — являются высокоспецифическими маркерами диагности­ки М х — М 4 вариантов ОМЛ, а при вариантах М 5, М6, М 7 в большинстве случаев является отрицательной;

Положитель­ная реакция на неспецифическую эстеразу средней и высокой степени интенсивности характерна для моноцитарного лейкоза; положительная реакция на активность неспецифических эстераз: а-нафтилацетатэстеразы и/или ос-нафтилбутилатэстеразы наблюдается в эритробластах при М6 ОМЛ и подтверждает моноцитарную природу бластных клеток; реакция на кислую фосфатазу позитивна в 90 % случаев при Т-ОЛЛ.

Иммунофенотипирование клеток костного моз­га

Метод иммунофенотипирования клеток костного моз­га, крови, определения типа клетки и стадии её дифференцировки (CD — Cluster of differentation), на которой произошло развитие лейкоза (по поверхностным дифференцировочным антигенам и внутренним маркерам клеток).

Метод предна­значен для предварительной и окончательной диагностики острых лейкозов, определения группы риска, прогноза и под­бора дифференцированного лечения. Кроме костного мозга и крови, объектами исследования могут являться клетки, лимфатические узлы , гистологические биоптаты. Образцы костного мозга и крови стабилизируются-антикоагулянтами (гепарин, цитрат натрия, ЭДТА) и обрабатываются не позже шести часов после забора. Достоверные данные получаются при использовании клеточных взвесей, содержащих не менее 20 % бластных клеток.

Для характеристики острых лейкозов используется панель моноклональных антител (таблица 30). Учёт фенотипа клеток осуществляется с помощью их иммуноферментного окраши­вания методом проточной цитометрии. Маркер считается по­зитивным, если 20 % и более клеток положительны с моно­клональным антителом. Исключение составляет анти-МРО, CD3, CD79a, TdT (из-за их высокой специфичности достаточно и 10 % окрашенных клеток).

Цитогенетическое исследование костного моз­га

Метод цитогенетического исследования костного моз­га необходим для всех пациентов с впервые выявленным лейкозом, а также с рецидивом заболевания. Используется метод дифференциальной G-окраски хромосом в метафазных пластинках с определением характерных хромосомных ано­малий в зависимости от вида лейкоза.

Молекулярно-генетический анализ

Молекулярно-генетический анализ (методы расшифров­ки нуклеотидных последовательностей генов) используется для выявления хромосомных аберраций в остром периоде заболевания (при О ЛЛ — del (9р;21), t (9;22); t (4;11), t (1; 19) и t (12;21); при ОМЛ — t (8;21); t (15;17); inv (16), t (9;11)) и в стадии ремиссии для диагностики минимальной резидуальной болезни (обнаружение остаточного пула опухолевых клеток).

Исследование клеточного состава ликвора

Метод исследования клеточного состава ликвора ис­пользуется для диагностики нейролейкоза. Его признаки: цитоз более 5 лейкоцитов в 1 мм3 и/или наличие бластных клеток.

Микробиологическое и вирусологическое исследование биосубстратов

Микробиологическое и вирусологическое исследование биосубстратов — диагностика инфекционных осложнений. Кроме изложенного, следует помнить, что всегда необходи­ ма настороженность по ранней диагностике рецидива острого лейкоза. Диагностика рецидива острого лейкоза проводится с использованием всех вышеперечисленных методов независимо от морфологического и иммунологического варианта лейкоза.

Диагностика острого лейкоза у детей. Прочие методы исследования

  • Биопсия печени, селезёнки, лимфатического узла с целью обнаружения бластных клеток.
  • Коагулограмма (диагностика ДВС-синдрома).
  • Рентгенография органов грудной клетки с целью вы­явления увеличенных внутригрудных лимфатических узлов, поражения лёгких, тимуса и др.
  • Ультразвуковое исследование органов брюшной по­лости (выявление гепато-, спленомегалии, увеличенных лим­фатических узлов).
  • ЭКГ и ЭхоКГ (вы явление признаков поражения сердца).

Читайте также: